2021年11月，酶成品申报的“一种酶组合物及化学酶法合成玻色因的方法”、“一种通过缩醛/缩酮保护再还原合成玻色因的方法”、“一种通过酰化保护再还原合成玻色因的方法” 荣获国家发明专利授权。酶成品始终坚持自主创新，重视对公司核心技术与知识产权的保护。此次再获三项发明专利证书，意味着公司在玻色因的绿色合成工艺上实现崭新突破。

玻色因

玻色因（Pro-xylane），INCI名为Hydroxypropyl Tetrahyclropyantiol，是一种从山毛榉树中提取的木糖衍生物。目前市面上的玻色因大多是「水+丙二醇+羟丙基四氢吡喃三醇」构成的原料组，其中核心功效性成分是羟丙基四氢吡喃三醇，故以此为玻色因的备案名称。

细胞外基质（ECM）存在于皮肤真皮层中，是由细胞外的蛋白质、多糖、胶原等大分子构成的复杂网状结构，具有为细胞提供支撑与固定、调节细胞间通信与互动等功能。细胞外基质（ECM）中存在着大量的蛋白聚糖（PGs），它们由糖胺聚糖（GAGs）和核心蛋白构成。玻色因通过刺激糖胺聚糖（GAGs）的活性与合成，不仅能促进蛋白聚糖（PGs）的生成，维持细胞外基质（ECM）网状结构；还能大幅度提升细胞外基质（ECM）间的水分含量，使皮肤更有弹性、更细腻，达到抵抗衰老的作用。

S-玻色因

玻色因这类化合物有多种立体构型，分别为[α，R]、[α，S]、[β，R]、[β，S]，不同的构型特征对成分活性的影响非常之大，同时也导致其性状有所不同。在欧莱雅专利CN100441588C与研究论文Synthesis of Pro-XylaneTM: A new biologically active C-glycoside in aqueous media（DOI:10.1016/j.bmcl.2008.12.037）中，实验数据证明[β，S]构型的活性远高于[β，R]与[β，S]混合物的活性。

定性/定量分析

● 氢谱

氢谱提供了三类极其有用的信息：化学位移（吸收位置在碳链上的位置）可分析出玻色因6号位置上氢的化学位移与氢的个数，也可看出7号位上S构型羟基或R构型羟基对6号位置上2个氢化学位移的影响。谱图显示，S构型6号位上1个氢受异构体影响的化学位移δ为1.67，而R构型该氢出现的化学位移为δ1.52。下图为S、R构型氢谱重叠图。

● 化学纯度

我们开发了一套示差HPLC方法，能够区分开S-玻色因和其他杂质，结果显示酶成品生产的玻色因纯度＞99.0%以上。同时，通过分析不同厂家的玻色因色谱纯度，我们发现市面上所谓的玻色因纯度差异非常之大。

● 手性纯度

我们开发了S-玻色因的手性液相色谱法，结果显示酶成品所产玻色因S构型＞99.0%以上。通过分析不同厂家所产玻色因的手性纯度，我们得出以下结果：市面上所谓的玻色因手性纯度差异明显，很多是消旋体或者S-玻色因仅占小部分，这样的产品将对最终添加量造成极大影响。

功效实验

我们委托兰州大学，通过MTT比色方法检测酶成品所产玻色因的安全性，通过双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）方法检测酶成品所产玻色因促进人体成纤维细胞内生成胶原蛋白与弹性蛋白的效果。

酶成品所产玻色因在0－500 μM（0－96 ppm）浓度范围内对细胞无杀伤能力，此浓度范围内作用安全（空白对照为对照组，即未做任何处理的正常细胞）。

紫外线照射会造成I型胶原蛋白的损失，而加入酶成品所产玻色因的组别，I型胶原蛋白有明显的恢复。随着浓度增加，酶成品所产玻色因促进I型胶原蛋白生成的效果愈加显著。

与竞品相比，酶成品所产玻色因促进I型胶原蛋白生成的作用更明显。在相同的浓度下，作用效果更加显著。

紫外线照射会造成弹性蛋白的损失，而加入酶成品所产玻色因的组别，弹性蛋白有显著的恢复。随着浓度的增加，酶成品所产玻色因促进弹性蛋白生成的效果越发明显。

结论：

1.酶成品所产玻色因在0－500 μM（0－96 ppm）浓度范围内对人体成纤维细胞无明显毒性。

2.酶成品所产玻色因能显著促进I型胶原蛋白及弹性蛋白生成，具有优异的抗衰抗皱功效。

3.与竞品相比，酶成品所产玻色因促进生成I型胶原蛋白的效果更加明显。

关于酶成品

广州酶成品生物技术有限公司成立于2017年，是一家以合成生物技术为核心，多学科交叉应用的创新型高新技术企业。全球率先将合成生物技术应用于“生命分子”的全绿色商业化生产，推动特色功能性原料领域的“碳中和”和“碳减排”，其产品应用覆盖生物医药、营养健康、医美日化、动物保健、绿色农业及生物材料等领域。

“生命分子”是指包含氨基酸、糖、核苷酸等基本单元分子中的一种或多种，且表现出优异的“安全性”、“有效性”和“可及性”的功能分子。

参考资料：
 

1. Cavezza, A., Boulle, C., et al. (2009). Synthesis of Pro-XylaneTM: A new biologically active C-glycoside in aqueous media. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 19(3), 845–849. 

doi:10.1016/j.bmcl.2008.12.037

2. Vassal-Stermann, E., Duranton, A., et al. (2012). A New C-Xyloside Induces Modifications of GAG Expression, Structure and Functional Properties. PLoS ONE, 7(10), e47933. 

doi:10.1371/journal.pone.0047933

3. Deloche, C., Minondo, A. M., et al. (2011). Effect of C-xyloside on morphogenesis of the dermal epidermal junction in aged female skin. An unltrastuctural pilot study. European Journal of Dermatology, 21(2), 191–196.

doi:10.1684/ejd.2010.1225